ምድላውን ጠለባትን ናይ ደርሆ ኣድሪኖሜዱሊን (ADM) ሪኣጀንት

Apr 06, 2021

1. ሴረም፡ ኣብ ናይ ክፍሊ ሙቐት ን10-20 ደቓይቕ ምጽማድ፡ ን20 ደቓይቕ ብፍጥነት 2000-3000 r.pm ሴንትሪፉጌሽን ምግባር። ልዕሊ ማይ ብጥንቃቐ ኣኪብካ ኣብ እዋን ምኽዛን ዝናብ እንተተራእዩ እንደገና ሴንትሪፉጅ ምግባር።

2. ፕላዝማ፡- ብመሰረት እቲ መርመራ ዝጠልቦ ከም ጸረ-ረኽሲ EDTA ወይ ሶድየም ሲትሬት ክምረጽ ኣለዎ። ን10-20 ደቓይቕ ድሕሪ ምሕዋስ ን20 ደቓይቕ ብፍጥነት 2000-3000 r.pm ሴንትሪፉጅ ምግባር። ልዕሊ ማይ ብጥንቃቐ ኣኪብካ ኣብ እዋን ምኽዛን ዝናብ እንተተፈጢሩ እንደገና ሴንትሪፉጅ ምግባር።

3. ሽንቲ: ብጽሩይ ቱቦ ምእካብ፣ ን20 ደቓይቕ ብፍጥነት 2000-3000 r.pm ሴንትሪፉጅ ምግባር። ልዕሊ ማይ ብጥንቃቐ ኣኪብካ ኣብ እዋን ምኽዛን ዝናብ እንተተፈጢሩ እንደገና ሴንትሪፉጅ ምግባር። ፈሳሲ ቶራሲክን ከብድን፣ ፈሳሲ ሓንጎል ዓንዲ ሕቖ መወከሲ ኣተገባብራ።

4. ዋህዮ ባህሊ ልዕሊ ማይ (cell culture supernatant): ፍሳስ ዝፈስስ ባእታታት ኣብ ዝረኽበሉ እዋን ብጽሩይ ቱቦ ምእካብ። ን20 ደቓይቕ ብፍጥነት 2000-3000 r.pm ሴንትሪፉጅ ምግባር። ልዕሊ ማይ ዘሎ ማይ ብጥንቃቐ ምእካብ። ኣብ ዋህዮታት ዝርከቡ ባእታታት ኣብ ዝረኽብሉ እዋን፡ እቲ ዋህዮ ስንብራት ብፒቢኤስ (pH 7.2-7.4) ተቐላቒሉ፡ ትሕዝቶ ዋህዮታት ድማ ኣስታት 1 ሚልዮን/ሚሊ ሊትር በጺሑ። ብተደጋጋሚ ምቕዛፍን ምፍሳስን ኣቢሎም እቶም ዋህዮታት ይጠፍኡ እሞ እቶም ኣብ ውሽጢ ዋህዮታት ዝርከቡ ባእታታት ይለቐቑ። ን20 ደቓይቕ ብፍጥነት 2000-3000 r.pm ሴንትሪፉጅ ምግባር። ልዕሊ ማይ ዘሎ ማይ ብጥንቃቐ ምእካብ። ኣብ እዋን ምዕቃብ ዝናብ እንተተፈጢሩ፡ እንደገና ሴንትሪፉጅ ምግባር።

5. ቲሹ መርኣያ፦ ድሕሪ ምቑራጽ መርኣያ ንመዝኖ። ዝተወሰነ መጠን ፒቢኤስ፡ PH7.4 ምውሳኽ። ንደሓር ንኽትጥቀመሉ ኣብ ፈሳሲ ናይትሮጅን ቅልጡፍ ምዕቃብ። እቲ መርኣያ ድሕሪ ምቕላጥ ካብ 2-8 ዲግሪ ሙቐት ይጸንሕ። ዝተወሰነ መጠን ፒቢኤስ (PH7.4) ተወሰኸሉ፣ እቲ መርኣያ ድማ ብኢድ ወይ ብሆሞጀናይዘር ምሉእ ብምሉእ ሆሞጀናይዝ ተገይሩ። ን20 ደቓይቕ ብፍጥነት 2000-3000 r.pm ሴንትሪፉጅ ምግባር። ልዕሊ ማይ ዘሎ ማይ ብጥንቃቐ ምእካብ። ሓደ ንመርመራ መቒልካ ዝተረፈ ንዕቑርነት ኣብ በረድ ምቕማጥ።

6. መርመራታት ድሕሪ ምእካብ ብዝተኻእለ መጠን ቀልጢፎም ክውሰዱ ይግባእ። ምውጻእ ብመሰረት ዝምልከቶ ጽሑፋት ክካየድ ኣለዎ፣ ድሕሪ ምውጻእ ድማ ብዝተኻእለ መጠን ብቕልጡፍ ፈተነታት ክካየድ ኣለዎ። እቲ መርመራ ብቕጽበት ክካየድ እንተዘይክኢሉ እቲ መርኣያ ኣብ -20 ዲግሪ ክኽዘን ይኽእል እዩ፣ ግን ተደጋጋሚ ምቕዛፍን ምፍሳስን ክውገድ ኣለዎ።

7. NaN3 ዝሓዘ ናሙና ክፈልጥ ኣይክእልን፣ ምኽንያቱ NaN3 ንንጥፈታት HRP ይዓግት።