ስጋ ሓሰማ ፓርቮቫይረስ ጸረ-ኣካል ኤሊሳ ኪት

ስፔሲፊኬሽን .

 

 

ናይ ፈተና ኣገባብ & ትርጉም

 

ደረጃ 1 ኣገባብ ፈተና .

1.1 ምድላው ፍታሕ ምሕፃብ

Wምትእኽኻብ ኦርኪንግ . wናይ ኣሺንግ ፈሳሲ:ቅድሚ ምጥቃም እቲ መሕጸቢ ፍታሕ ናብ ናይ ክፍሊ ሙቐት (20-25 ዲግሪ ) ክምለስን ሓደ ዓይነት ንኽኸውን ድማ ብማዕረ ክናወፅን ይግባእ። ብድሕሪኡ 20 ግዜ ነቲ ዝተዋህለለ መሕጸቢ ፍታሕ ብዝተጸረየ ማይ ይፈስስ (ንኣብነት 5ml ዝተዋህለለ መሕጸቢ ፍታሕ ኣብ 95ml ዝተጸረየ ማይ ይውሰኽ)፣ ጽቡቕ ምሕዋስ፣ እቲ ዝተቐላጠፈ መሕጸቢ ፈሳሲ ድማ ን7 መዓልታት ብ2-8 ዲግሪ ክኽዘን ይኽእል።

1.2 ናሙና ምድላው

1 ምሉእ ደም እንስሳ ተወሰደ፣ ኣብ 4000rpm ን10 ደቓይቕ ሴንትሪፉጅ ተገይሩ፣ ኣብ ልዕሊኡ ዝነበረ ማይ ድማ ተኣከበ። ሴረም ብዘይ ሄሞላይሲስ ብተፈጥሮኣዊ መንገዲ እውን ክተሓዋወስ ይኽእል እዩ።

2 ኣብ ሴረም ዲሉሽን ፕሌት 10 ግዜ ክፍተን ዘለዎ ሴረም ኣቃሊልዎ (ንኣብነት:ን135UL ናሙና ዲሉንት ክፍተን ዘለዎ 15UL ናይ ሴረም ምውሳኽ)።

መተሓሳሰቢ፡ ኣሉታውን ኣወንታዊን ቁጽጽር ክፈስስ ኣየድልዮን እዩ።

1.3 ኣገባብ ፈተና .

2 ነቲ ናይ ኢንዛይም ምልክት ማይክሮፕሌት ውሰድ (ብመሰረት ቁጽሪ ናሙናታት፣ ክትፍታሕን ብዙሕ ግዜ ክትጥቀመሉን ትኽእል ኢኻ)፣ 100UL ናይቲ ዝተቐልቀለ ሴረም ናብቲ ናይ ኢንዛይም ምልክት ማይክሮፕሌት ወሲኽካ ነፍሲ ወከፈን ክልተ ዒላታት ንኣሉታዊ ቁጽጽርን ኣወንታዊ ቁጽጽርን ኣቐምጥ፣ ብቕደም ተኸተል 100UL ኣብቲ ግብረ መልሲ ውሰድ። ነቲ ናሙና ኣብቲ ዒላ ቀስ ኢልካ ንቕንቕ፣ ነቲ ናይ መዕጸዊ ጽላት ፊልም ተጠቒምካ ነቲ ጻሕሊ ንምሽፋን፣ ን30 ደቓይቕ ድማ ብ37 ዲግሪ ምሕብባዕ።

2 ነቲ ናይ መዕጸዊ ጻሕሊ ፊልም ከፊትካ ነቲ ኣብቲ ጻሕሊ ዘሎ ፍታሕ ዒላ ንቕንቕሎ፣ ኣብ ነፍሲ ወከፍ ዒላ 300μL ናይ ስራሕ ምትእኽኻብ ፈሳሲ ምሕጻብ ፈሳሲ ወሲኽካ ድሕሪኡ ነቲ ፈሳሲ ኣብቲ ዒላ ደርብዮ። ነዚ ኣብ ላዕሊ ዘሎ ስጉምትታት 5 ግዜ ደጋግምዎ፣ ኣብ መወዳእታ ድማ ኣብ ጽሩይ መምጠጢ ወረቐት ድቕድቕ በሉ።

3 100μL ምስ ነፍሲ ወከፍ ዒላ ዝተሓዋወሰ ኢንዛይም ምውሳኽ፣ ነቲ ጻሕሊ ሸፊንካ ን30 ደቓይቕ ብ37 ዲግሪ ምሕቃቕ።

ነቲ ናይ መዕጸዊ ጻሕሊ ፊልም ብምኽፋት ኣብቲ ፕሌት ዒላ ዘሎ ፍታሕ ንቕንቕ ኣቢልካ 300μL ናይ ስራሕ ምትእኽኻብ ፈሳሲ ምሕጻብ ፈሳሲ ወሲኽካ ኣብ ነፍሲ ወከፍ ዒላ ወሲኽካ ነቲ ፈሳሲ ኣብቲ ዒላ ደርብዮ። ነዚ ኣብ ላዕሊ ዘሎ ስጉምትታት 5 ግዜ ደጋግምዎ፣ ኣብ መወዳእታ ድማ ኣብ ጽሩይ መምጠጢ ወረቐት ድቕድቕ በሉ።

5 ናብ ነፍሲ ወከፍ ዒላ 100μL ሳብስትሬት ፍታሕ ምውሳኽ፣ ነቲ ጻሕሊ ሸፊንካ ን10 ደቓይቕ ካብ ብርሃን 37 ዲግሪ ርሒቕካ ንቕልቅሎ።

2 ንነፍሲ ​​ወከፍ ዒላ 50μL STOP solution ምውሳኽ፣ ኣብ ውሽጢ 5 ደቓይቕ ድማ ነቲ ውጽኢት ውሰድ።

 

ደረጃ 2 ውጽኢት ትርጉም

 

OD450 ዋጋ ናይ ነፍሲ ወከፍ ዒላ ኣብቲ 96-well microplate reader ተነቢቡ።

2.1 ምጽዳቕ .

ማእከላይ OD450Nm ዋጋ ኣሉታዊ ቁጽጽር < 0.2 ኮይኑ ማእከላይ OD450Nm ዋጋ ኣወንታዊ ቁጽጽር ካብ 0.7 ዝዓበየ ወይ ማዕረ እዩ ነይሩ፡ ውጽኢት ፈተነ ቅኑዕ እዩ ነይሩ። እንተዘይኮይኑ እቲ ፈተና ክድገም ኣለዎ።

2.2 ኣገባብ ስሌት .

ንነፍሲ ወከፍ ናሙና፡ ነቲ s/ p ከምዚ ዝስዕብ ጌርካ ኣስልሖ፡ ዝተኣረመ ናሙናን ናይ ምቁጽጻር ክብርታትን ተጠቒምካ፤

2.3 ትርጉም ውጽኢት .

S/P < 0.25 ምስ ዝኸውን ኣሉታዊ ተባሂሉ ይፍረድ።

S/P > 0.3 ምስ ዝኸውን ኣወንታዊ ኮይኑ ይፍረድ።

ካብ 0.3 0.25 ትሕቲ ወይ ማዕረ S/P ምስ ዝንእስ ወይ ማዕረ ምስ 0.3 ማዕረ ምስ ዝኸውን፡ ከም ጥርጡር ከም ዝፍረድ፡ ድሕሪ ሓደ ሰሙን ናሙና ምውሳድን ምፍታንን ክትደግምን ክትፍትኖን ትእምት።

ውዑይ መለለዪ: porcine parvovirus antibody elisa kit, ቻይና ፖርሳይን ፓርቮቫይረስ ጸረ-ኣካል ኤሊሳ ኪት ኣቕረብቲ, ኣፍረይቲ, ፋብሪካ